產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
該2X RT-PCR Master Mix用于使用TaqMan探針進(jìn)行實(shí)時(shí)定性和定量多重RT-PCR擴(kuò)增。
1)該試劑盒設(shè)計(jì)用于最多五對(duì)引物和五個(gè)TaqMan探針的多重RT-PCR。
2)該預(yù)混液是一種預(yù)混合的2X濃縮溶液,包含除基因特異性引物、探針和RNA模板之外的所有成分。
3)在單管形式中,多重RNA模板首先通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)化為cDNAs,然后依賴(lài)DNA的DNA聚合酶擴(kuò)增cDNAs和其5'-3'核酸外切酶酶切TaqMan探針產(chǎn)生熒光信號(hào)。
4)對(duì)于逆轉(zhuǎn)錄步驟,該試劑盒采用超高效的嗜熱逆轉(zhuǎn)錄酶,一種嗜熱A型聚合酶。它在60-62℃效果最佳,克服了高GC含量和豐富的二級(jí)結(jié)構(gòu)帶來(lái)的困難。該酶在RNA模板上高效合成 互補(bǔ)DNA鏈,每20μL 反應(yīng)可合成1-2個(gè)單位。該酶始終如一地反轉(zhuǎn)錄目標(biāo)RNA分子的個(gè) 位數(shù)拷貝。
5)該試劑盒還包含專(zhuān)為T(mén)aqMan探針設(shè)計(jì)的Taq探針DNA聚合酶,其增加5'-3'核酸外切酶活性可產(chǎn)生S形曲線(xiàn)。
產(chǎn)品特征:
1)該逆轉(zhuǎn)錄酶是嗜熱A型聚合酶,最適溫度為60-62℃。
2)該逆轉(zhuǎn)錄酶易于在高于90℃的溫度下滅活1min。
3)該逆轉(zhuǎn)錄酶從一個(gè)基因特異性引物中有效地合成互補(bǔ)性DNA鏈RNA模板,每20μL的單鏈反 應(yīng)小于1個(gè)單位。
4)該逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄目標(biāo)RNA分子的個(gè)位數(shù)拷貝一致。
5)該試劑盒還包含專(zhuān)為T(mén)aqMan探針設(shè)計(jì)的Taq探針DNA聚合酶,可生成S形曲線(xiàn)。
6)PCR產(chǎn)物大小宜小于150bp。